His标签纯化原理:
组氨酸标签也称His-tag,由于其具有分子量小(~0.84 KD)、免疫原性低、纯化条件温和等特点,成为最简单、应用最广泛的纯化标签,具有六个或更多连续的组氨酸残基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端,利于纯化。His标签可以和Ni2+、Co2+等过渡金属离子形成配位键从而与金属离子选择性的结合,使含有His标签的蛋白质特异性地结合到固定化的金属离子上,而其他蛋白质则没有这种结合能力。通过改变溶液的pH值或使用竞争性配体,可以有效地洗脱结合的蛋白质。
目前Histag蛋白纯化磁珠主要包括镍离子(Ni2+)和钴离子(Co2+)两种金属离子螯合磁珠。它们在目标蛋白结合量及所得目标蛋白纯度上有所差异,镍离子螯合磁珠能满足大多数用户对蛋白载量和纯度的要求;对纯度要求更高的用户可以使用钴离子螯合磁珠。
His-Tag蛋白纯化磁珠分选His-tag蛋白的原理
产品特点:
东纳生物提供的Histag蛋白纯化磁珠是由Nα,Nα-双(羧甲基)-赖氨酸水合物(ANTA)共价偶联至1 mm羧基磁珠,再通过ANTA的4个结合位点螯合二价镍离子(Ni2+)制备而成,具有超顺磁性、磁响应速度快、亲水性好、单分散性好、蛋白载量高等特点,可特异性地与动植物或者微生物裂解液、血清、腹水等样品中含有His标签的蛋白结合,从而用于带有His标签蛋白或蛋白复合物的纯化、免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。与传统柱层析方法相比,使用Histag蛋白纯化磁珠纯化His标签蛋白无需控制上样流速和多次离心样品,也不需要昂贵的层析和离心设备。样品与磁珠的结合以及目的蛋白与磁珠的分离简单、快捷,而且更容易实现高通量、自动化的蛋白纯化方法。适合科研和工业客户高通量地进行组氨酸标签蛋白的纯化。
产品信息:
基质 | 磁性微球 |
粒径 | 约1 μm |
磁珠浓度 | 40 mg/mL |
螯合金属离子 | Ni2+ |
蛋白载量 | ~15 μg 6×His-tagged Protein/ 1 mg MagBeads |
保存条件 | 密封,4℃/24个月,禁止冷冻,使用前请充分混匀 |
包装 | 塑料瓶 |
订货信息:
