应用案例│磁性纳米颗粒和静态磁场对骨髓间充质干细胞的刺激:释放外源性miR-1260a可促进成骨和血管生成骨修复的治疗目前仍面临巨大挑战,自体和异基因移植两种标准临床治疗方法因供应有限、供区并发症等限制无法广泛应用。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是促进骨缺损修复中的成骨和血管生成的有吸引力的潜在治疗剂。而来源于干细胞的外泌体,由于可以发挥与干细胞相似的旁分泌功能,并且能克服干细胞移植的局限性,引起广泛关注。来自骨髓间充质干细胞的外泌体(BMSC-Exos)已被证实可促进成骨和血管生成。磁性纳米颗粒(如Fe3O4,γ-Fe2O3)与静磁场(SMF)相结合通常用于促进伤口愈合和骨再生。因此,本研究旨在评估经低剂量Fe3O4纳米颗粒(南京东纳生物科技有限公司)和/或SMF预处理的骨髓间充质干细胞衍生的外泌体是否在骨再生中发挥优异的促成骨和促血管生成活性,以及相关的潜在机制。图1. 源自BMSC-Fe3O4-SMF-Exos外泌体的miR-1260a通过靶向HDAC7促进成骨,并通过靶向COL4A2促进血管生成﹀﹀﹀本文重点1.将骨髓间充质干细胞(BMSCs)分别培养在含有不同浓度Fe3O4纳米颗粒(0、25、50、100和200 µg/mL)的培养基中,并暴露于不同强度(0、50、100和200 mT)的静磁场(SMF),以确定BMSCs生长增殖的最佳刺激条...
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2023
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应用案例│东纳MagBeads® TiO2磁珠助力纯化血浆细胞外囊泡用于糖尿病视网膜病变研究具有规律性波动的细胞外囊泡(EVs)载体可为临床诊断和预后提供预判。血浆样本是循环EVs最重要的来源之一。然而目前EVs分离技术主要为超速离心法、超速密度梯度离心法、聚合物沉淀法、免疫亲和法、超滤法、尺寸排阻色谱法等。血浆EV分离具有较高的技术壁垒和成本消耗,限制其在疾病诊断和生物标志物发现的应用。最近,来自温州医科大学的潘优津、陈途灿等人采用Fe3O4@TiO2磁珠(购自东纳生物,货号MBTi-B)提取血浆小细胞外囊泡sEVs,工作发表在Anal.Chem.(IF=8.008)上。Fe3O4@TiO2磁珠粗糙岛状的TiO2表面具有尺寸排阻效应,可增强结合点,通过膦脂亲和力,有效可逆地捕获sEVs。与超速离心方法相比,整个过程小于20分钟,并且可以从100 mL血浆样品中提取约108 sEVs。对糖尿病视网膜病变(DR)疾病过程中sEVs的代谢变化进行研究,发现了一组显著的代谢产物量的提高,这预示着sEVs的代谢波动与糖尿病视网膜病变发病和发展相关。这样一个灵活可放大的EVs捕获系统能成为以血浆为基础的液体活检的有效分析工具。 图1:Fe3O4@TiO2磁珠用于血浆sEV分离及下游分析的示意图本文重点:1.摸索了TiO₂磁珠提取血浆EVs的最...
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2023
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东南大学生物科学与医学工程学院与南京东纳生物科技有限公司的研究者共同开发了一种简单的抗体取向结合在聚苯乙烯纳米颗粒表面的方法。 纳米探针已经在体外诊断领域得到了广泛的应用。然而在一般方法中,抗体通常是方向随机地吸附或偶联在纳米颗粒载体上,其抗原识别位点容易被占用或受到空间位阻的影响,导致纳米探针对抗原的特异性结合能力降低。为了改善抗体取向,使更多抗原结合位点充分暴露,研究者们提出了一系列新方法,代表性的技术包括利用抗体特殊位点(如Fc端寡糖链、铰链区二硫键)、引入夹层蛋白(如蛋白A、蛋白G、蛋白L)、分子印迹、抗体融合His-tag等。这些方法通常操作步骤比较复杂,成本较高,或需要对抗体改性,或需要引入新的组分,不易向实际应用中转化。 近日,东南大学生物科学与医学工程学院与南京东纳生物科技有限公司的研究者共同开发了一种简单的抗体取向结合在聚苯乙烯纳米颗粒表面的方法,即基于大家熟悉的EDC/Sulfo-NHS交联法,调整抗体和载体纳米颗粒的反应pH,并将这一条件下制备的探针用于心肌肌钙蛋白I 侧向免疫层析检测。结果表明,抗体结合量和结合取向以及抗原检测灵敏度都得到了显著提高。虽然调节pH值是优化抗体结合常用的手段,但本文首次深入探讨了该手段增强抗体取向的机制,并揭示了抗体密度、电荷分布和亲疏水性的重要性,物理吸附和化学偶联速度以...
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2019
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生物素(Biotin)-链霉亲和素(Streptavidin)是最常见的生物学高特异、高亲和力结合系统,常被用于结合、分离/纯化生物素化的抗体、蛋白质、多肽、核酸以及其它分子或者相互作用复合体。链霉亲和素-生物素系统具有极高的结合亲和力(K =10-15),在生物领域具有广泛的应用。东纳生物MagBeadsTM链霉亲和素磁珠通过共价偶联技术将链霉亲和素固定在磁珠表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。与常规通过生物分子表面的氨基或羧基与磁性微球表面基团共价偶联生物分子方法相比,选用链霉亲和素磁珠方法简单、统一,偶联方案不会受表面固定生物分子的等电点等特性影响。所固定的生物分子通过生物素与链霉亲和素磁珠相连,生物分子活性不受影响。链霉亲和素磁珠粒径约为1.0 μm,具有超顺磁性及磁响应快速的优点。同时,链霉亲和素磁珠具有极高的链霉亲和素载量及极好的亲水性,可确保高的抗体、核酸偶联量及低的非特异性吸附。另外,链霉亲和素磁珠还具有优良的磁稳定性、悬浮性、再分散稳定性,以及较宽pH体系稳定性,可以保证反应的均一性及检测一致性,适用于自动化高通量实验操作。构建好的链霉亲和素修饰磁珠与生物素化抗体、核酸的高度的特异反应,可以免去常规磁珠的活化、偶联、封闭等步骤,即买即用,是蛋白、核酸分离的万能工具。图1. MagBeadsTM链霉亲和素磁珠的电镜图、结构示意图以及应用实例列举...
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