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东纳生物MagBeads™ Oligo(dT)18 磁珠代替传统柱层析方法用于mRNA的快速提取和纯化

日期: 2018-11-06
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大多数真核生物的mRNA在其3’端带有polyA)尾巴,此poly A结构为mRNA的提取提供了有效的途径。人们利用碱基配对原理,采用寡聚T结构作为亲和柱材料,当含mRNA的总RNA样品流经寡聚T柱时,mRAN即被特异性的结合到柱上,从而可与其它RNA分开,这就是寡聚(dT)纤维素亲和柱分离mRAN的原理。然而Oligo-dT亲和层析柱填充时所需Oligo-dT用量大,回收损失大,其他试剂用量也大,成本消耗大。相比之下,Oligo(dT)磁珠提纯筛选mRNA的方法速度更快,纯度更高,不需要传统方法的层析分离。


南京东纳生物科技有限公司的MagBeads Oligo(dT)18磁珠产品可用于从真核生物总RNA或直接从动植物组织、细胞中快速分离出完整的、高纯度的mRNA。提取的mRNA可用于分子生物学的各种下游实验中,如RT-PCRcDNA文库的构建、Northern Blot分析、cDNA微阵列、亲和纯化、引物延伸、消减杂交引物延伸,基因表达分析等。


MagBeads Oligo(dT)18通过共价键结合力,将表面修饰有亲和素的磁珠与生物素化的寡核苷酸单链偶联,磁珠为1微米大小,具有高表面积、高亲和力和高特异性的特性,从而提取高纯度的mRNA。可以很容易地根据样本放大或缩小这个过程,提高了下游应用的灵活性。


MagBeads Oligo(dT)18磁珠具有超顺磁性,在没有磁场的情况下保持胶体稳定外,当有磁场存在时,这些粒子可以迅速、完全地分离。


MagBeads Oligo(dT)18磁珠的使用依赖于mRNAPloy A尾部与磁珠表面的dT序列之间的碱基互补配对。利用标准杂交条件,可以很容易地将聚腺苷酸化的RNA (poly-A+ RNA)结合到oligo (dT)上面,其他RNA种类(rRNAtRNA)不包含poly A+序列,因此不会与oligo(dT)磁珠结合。因此,分离的mRNA可以直接用于克隆和表达分析应用。由于低聚物dT自身的稳定性及与磁珠表面共价结合特性, MagBeads Oligo(dT)18可以被重复使用。

东纳生物MagBeads™ Oligo(dT)18 磁珠代替传统柱层析方法用于mRNA的快速提取和纯化

东纳生物MagBeads™ Oligo(dT)18 磁珠代替传统柱层析方法用于mRNA的快速提取和纯化

1. MagBeads Oligo(dT)18磁珠的电镜图、结构示意图以及提取mRNA过程示意图


东纳生物MagBeads™ Oligo(dT)18 磁珠代替传统柱层析方法用于mRNA的快速提取和纯化

2. MagBeads Oligo(dT)18磁珠与国外知名公司基本性能比较



MagBeads™ Oligo(dT)18的主要产品性能:


Ø  MagBeads Oligo(dT)18的实验方案可在15分钟内完成,无需其他纯化步骤。

Ø  磁珠修饰的Oligo(dT)18可在捕获mRNA后作为反转录成cDNA的第一链的引物。

Ø  非常高的poly A+特异性结合能力确保最大限度地提取mRNA

Ø  优秀的胶体稳定性显著减缓无磁场下的沉降。

Ø  1 mgMagBeads Oligo(dT)18磁珠可以结合2~4 μg来自细胞或组织的mRNA(取决于表达水平)。

Ø  来自细胞的rRNA是远远过量的,即使非特异性捕获效率低,仍会有一定的rRNA结合,在dT18上的rRNA通常会比dT25上的少。



南京东纳生物科技有限公司的MagBeads™ Oligo(dT)18产品与国外知名公司相比,在oligo(dT)的偶联量,mRNA的提取量,磁珠的均一性稳定性等方面都具有可以比拟的性能优势,是mRNA提取及纯化的最佳选择。

 

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